科研服務 時間：2020-07-17 16:42:00 瀏覽：7875次
基因敲除敲入技術一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯騰生物利用最新的CRISPR/Cas系統可以有效的實現對細胞系特定基因的敲除和定點突變。
技術原理
Clustered Regularly Interspaced Short PalindromicRepeats（CRISPR）/Cas是細菌和古細菌不斷進化而獲得的免疫防御機制，其中II型CRISPR/Cas免疫系統依賴Cas9內切酶家族靶向和剪切外源DNA。CRISPR/Cas9系統通過小導向RNA(sgRNA)對切割區域進行識別，進而利用Cas9內切酶實現靶向區域的切割以產生DNA雙鏈斷裂。該系統靈活簡單，可實現多個靶點的同時操作。目前我們采用Double Nicking技術，顯著降低脫靶率。服務流程
本平臺可制備的動物模型（部分）
| 疾病 | 方法 | 動物 | 模型成功率 | 操作難度 | 耗時程度 |
| 帕金森疾病 | 6-OHDA腦立體定位注射 | Rat | 70%~80% | 簡單 | 比較耗時 |
| MPTP、IP或SC注射（急性or慢性） | Mouse | 70% | 簡單 | 快速 | |
| 抑郁癥 | 禁食、禁水、夾尾、冰水等慢性不可知刺激 | Rat | 80% | 簡單 | 非常耗時 |
| 利血平藥物注射或者懸尾和強迫游泳 | Mouse | 60% | 簡單 | 非常耗時 | |
| 脊髓損傷 | 脊髓半切、全斷、牽張、擠壓、打擊等 | Rat | 80% | 普通 | 非常耗時 |
| 腦外損傷 | 顱腦損傷儀打擊致損 | Rat | 80% | 普通 | 比較耗時 |
|
坐骨神經損傷 （周圍神經損傷） |
切斷或者夾閉神經（手術） | Rat | 90% | 簡單 | 一般 |
| 心肌缺血 | 心臟冠狀動脈左前降支結扎 | Rat | 60%~70% | 較難 | 非常耗時 |
| 心力衰竭 | 腹主動脈縮窄手術致心力衰竭 | Rat | 90% | 簡單 | 快速 |
| 肺動脈高壓 | 手術分流術和MCT IP或SC注射 | Rat | 80% | 普通 | 一般 |
| 高血壓 | 單腎單夾腎血管或者兩腎一夾型腎血管 | Rat | 80% | 簡單 | 快速 |
| 粥樣動脈硬化 | 高脂飲食+VD3喂養 | Rat/Mouse | 50% | 簡單 | 非常耗時 |
| 大腦中動脈阻塞（MCAO） | 線栓法制備 | Rat | 70% | 普通 | 比較耗時 |
| 慢性支氣管炎 | 煙熏 | Rat | 80% | 簡單 | 耗時 |
| 過敏性哮喘 | OVA+氫氧化鋁致敏 | Rat/Mouse | 80% | 普通 | 耗時 |
| 肺炎模型 | 鮑曼不動桿菌氣道滴注 | Rat/Mouse | 90% | 簡單 | 快速 |
| 肝炎—肝硬化—肝癌 | DEN誘導 | Rat | 80% | 簡單 | 比較耗時 |
| 肝纖維化 | CCL4誘導 | Rat | 80% | 簡單 | 耗時 |
| 膽結石模型 | 喂養致石飼料 | Mouse | 90% | 簡單 | 一般 |
| 急性胰腺炎 | 牛黃膽酸鈉胰膽管注射 | Rat | 90% | 普通 | 快速 |
| 急性腎衰竭 | 順鉑尾靜脈注射/腎動脈缺血 | Rat | 80% | 普通 | 一般 |
| 體內血栓 | 手術或者藥物誘導 | Mouse | 60-70% | 普通 | 比較耗時 |
| 關節炎模型 | Ⅱ型膠原+佐劑誘導 | Rat/Mouse | 90% | 簡單 | 一般 |
| Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病 | STZ或增加高脂飼料喂養藥物誘導 | Rat/Mouse | 80% | 簡單 | 比較耗時 |
| 荷瘤鼠/裸鼠成瘤 | 皮下成瘤 | BALB/cA-nu mice | 90% | 簡單 | 一般 |
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【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、病理染色檢測、細胞敲除&敲入、模式與轉基因動物、SPF動物保種、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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