
時間:2020-07-17 17:07:00 瀏覽:7235次
人類疾病的動物模型在醫學科學研究方面占有十分重要的地位。威斯騰生物動物中心經過十余年的發展,累積了豐富的動物培養和模型構建經驗,在動物模型構建方法上摸索出獨有經驗,常規動物模型構建平均成功率98%以上,重難點模型(開胸/開顱術等)構建平均成功率75%以上,形成了高效高質量的動物模型構建方法庫,可成功構建上百種疾病動物模型。
慢性抑郁型動物模型
抑郁是一種以情緒低落,思維遲鈍,行為遲緩為主要癥狀的精神疾病,同時可伴有睡眠減少,體重降低等軀體癥狀。
模型制作:慢性溫和的不可預知性應激(chronicmildstress,CMS)由Katz等 于1981年創立,但缺點較多,如過強的 應激刺激常導致動物死亡。由Willner等對其進行改進,是目前應用和研究較多的一種抑郁癥模型。讓大鼠在2~4周內每天經歷一種不愉快的輕度應激,包括冷水游泳(4℃,5min),電擊(電流強度1.0mA,頻率1次/分),熱環境(45℃,5min),日夜顛倒,閃光刺激(頻率3次/分),禁食,禁水,夾尾(1min)等刺激。每種刺激形式不連續2天出現,形成一種CMS,避免動物對同一種刺激產生適應。
模型行為評分:
目前尚無公認的經典測量抑郁情緒的測驗,在各種抑郁模型動物中主要通過以下試驗測量抑郁水平:多用敞箱試驗進行行為測評,表現為大鼠自發性探究行為明顯減弱,運動能力降低。體重減輕、性行為減少、血漿中糖皮質激素升高,睡眠周期紊亂。同時發現老鼠天生偏好糖水的興趣下降,運用糖水消耗試驗測定24h飲用1%蔗糖溶液的量,若糖水消耗顯著降低,表示抑郁模型造模成功。
模型評價:
抑郁模型可用于抗抑郁藥物的篩選及抑郁病理生理機制的研究,因其采用的刺激因子類似人在生活中經歷的應激事件強度,較好地模擬了人類快感缺乏、興趣降低這一核心癥狀,并且模型穩定持久,作為抑郁應激模型是理想的。
小鼠EAE模型制備
適應性喂養
實驗小鼠自購回后保持其自由飲水、進食,溫度23-25℃,動物房12h-12h晝夜交替,適應性喂養一周后進入實驗。
EAE造模
實驗鼠稱重,腹腔注射3.5%水合氯醛麻醉(0.5ml/100g),背部備皮,酒精棉球消毒后各小鼠分別于背部中線兩側皮下4點注射抗原乳劑(MOG35-55)0.2ml。免疫當天(第0d)及48h(第2d)分別給模型各組小鼠腹腔注射PTX每只500ng(0.2ml)。誘導小鼠產生EAE。
威斯騰實驗服務流程
威斯騰生物服務項目
分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
染色質免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
高血壓模型 | ||
病毒包裝 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
生長因子芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
炎癥因子芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
血管生成因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
凋亡因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
趨化因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 | |
膜片鉗實驗 | ||
細胞生物學檢測 | 高通量測序 | 代謝組學 |
細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
細胞成管實驗 | ||
病理檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本) |
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片(限人和小鼠來源樣本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
免疫熒光 | ||
Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等) |
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行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
曠場實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
重復性刻板行為檢測 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
動物跑臺檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
強迫游泳 | 分子藥理研究平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 | |
常規藥物體外篩選 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
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