
時間:2020-07-22 17:07:00 瀏覽:8005次
一、激光共聚焦顯微鏡
激光掃描共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源,在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察的對象進行數字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統。主要系統包括激光光源、自動顯微鏡、掃描模塊(包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測器)、數字信號處理器、計算機以及圖象輸出設備(顯示器、彩色打印機)等。通過激光掃描共聚焦顯微鏡,可以對觀察樣品進行斷層掃描和成像。因此,可以無損傷的觀察和分析細胞的三維空間結構。同時,通過激光掃描共聚焦顯微鏡也是活細胞的動態觀察、多重免疫熒光標記和離子熒光標記觀察的有力工具。
儀器名稱:激光共聚焦顯微鏡
英文名:Leica TCS SP2 AOBS
型號與規格:TCS SP2 AOBS
二、激光共聚焦顯微鏡組成
1、共聚焦掃描系統
(1)獨立雙向掃描鏡??梢栽谡蔑@微鏡和倒置顯微鏡之間迅速互換。儀器永久不用校正;可調的計算機控制單共焦針孔、孔徑20~600μm
(2)光譜掃描區400~850nm
(3)單線掃描頻率≥2000線/秒
(4)圖掃描率≥3幅/秒512×512pixels;≥20幅/秒512×32pixels
(5)掃描分辨率4096*4096掃描放大1~32X;多方位序列掃描方式;任意形狀區域掃描-范圍:≥22mm。
(6)光譜斜陡率 ≤1%
(7)透射光檢測器用于微分干涉相襯法檢驗
(8)低噪音 冷卻型光電倍增管(PNT)控測器12bi
2、激光裝置
具有多通道AOTF(四通道,八譜線),連接四種不同波長的可見光激光可以自動選擇激光譜線和功率,具等待功能。光纖耦合連接低能量激光。目前使用五激光,八譜線。Ar激光發生器 (458nm/5mw,476nm/5mw,488nm/20mw,514nm/20mw)-藍;He/Ne激光發生器(543nm/1.2mw)-綠;He/Ne激光發生器(633nm/10mw,594nm/2mv)-紅,紫外激光發生器(405nm/25mv)
3、顯微鏡:DMIRE2倒置電動熒光顯微鏡,擁有10x,20x,40x干鏡以及63x,100x油鏡。配置電動編碼物鏡轉座,Z軸電動驅動和干涉相襯的編碼棱鏡轉輪。
4、計算機工作站
WindowsXP操作系統,8個同步接收器通道,12bit同步數字轉換,超寬的SCSI電腦介面,高性能的電腦工作站,兩個監視器,計算機彩色顯示
主要附件和功能:
觀察細胞精細結構。用于檢測各種染色,非染色和熒光標記的組織和細胞等,在可見光范圍內熒光的定位定量分析,組織光學切片,基因染色體定位,基因亞細胞定位,離子通道研究.
三、檢測的優勢
與傳統光學顯微鏡相比,主要解決了生物樣品結構相互重疊影響觀察的問題,并可形成清晰的三維圖象。在檢測方面的主要優勢有:
1、對活細胞和組織或細胞切片進行連續掃描,可獲得精細的單個或一群細胞或者觀察到局部組織的各個層面結構(包括細胞特異結構—細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統,樣品的深層結構)的三維圖像。
2、細胞內離子熒光標記,單標記或三奈記,檢測細胞內如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動態變化。
3、熒光標記探頭標記的活細胞或切片標本的活細胞生物物質,膜標記、免疫物質、免疫反應、受體或配體,核酸等觀察;可以在同一張樣品上進行同時多重物質標記,同時觀察;
4、熒光檢測快、激發光強度精確控制、光漂白和熒光淬滅作用??;
5、對細胞檢測無損傷、精確、準確、可靠和優良重復性;數據圖象可及時輸出或長期儲存。
四、樣品要求
樣品制備無特殊要求;各種染色、非染色、熒光標記的組織(包括活組織)、培養細胞、粘附細胞、細胞涂片、石蠟切片、冰凍切片。
五、應用領域
1、細胞生物學:細胞結構、細胞骨架、細胞膜結構、流動性、受體、細胞器結構和分布變化、細胞凋亡;
2、生物化學:酶、核酸、FISH(熒光原位雜交)、受體分析
3、藥理學:藥物對細胞的作用及其動力學;
4、生理學:膜受體、離子通道、細胞內離子含量、分布、動態;
5、遺傳學和組胚學:細胞生長、分化、成熟變化、細胞的三維結構、染色體分析、基因表達、基因診斷;
6、神經生物學:神經細胞結構、神經遞質的成分、運輸和傳遞、遞質受體、離子內外流、 神經組織(如大腦皮質)結構、細胞分布;
7、微生物學和寄生蟲學:細菌、寄生蟲形態結構(表面和內部結構);
8、病理學及病理學臨床應用:活檢標本的快速診斷、腫瘤診斷、自身免疫性疾病的診斷,HIV,宮頸上皮細胞涂片診斷;
9、生物學、免疫學、環境醫學和營養學;
六、服務流程
威斯騰生物服務項目
分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
染色質免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
高血壓模型 | ||
病毒包裝純化 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
生長因子芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
信號通路磷酸化水平檢測芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
生長因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
炎癥因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
血管生成因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
凋亡因子芯片 | 基因編輯動物 | |
趨化因子芯片 | 電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 |
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實驗 | |
細胞生物學 | 高通量測序 | 代謝組學 |
細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
細胞成管實驗 | ||
病理學檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本) |
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片(限人和小鼠來源樣本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
免疫熒光 | ||
Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | |
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等) |
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行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
水迷宮實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 神經系統藥物藥效學評價 |
曠場實驗 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
重復性刻板行為檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
動物跑臺檢測 | 分子藥理研究平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
強迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
常規藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、病理染色檢測、細胞敲除&敲入、模式與轉基因動物、SPF動物保種、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
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